所谓分光,是利用色散现象可以将波长范围很宽的复合光分散开来,成为许多波长范围狭小的“单色光”,这种作用称为“分光”。像我们所知的,使用棱镜可以将太阳光分解为七色光,彩虹的形成就是为人所熟知的分光现象。
分光不同于棱镜分光(折射法)一种。但其他的分光现象一般需要较为复杂的方法实现,不太常见。具体的类型如下:
1)利用棱镜来分光(光的折射率依赖于波长);
2)利用衍射现象来分光;
3)利用法布里-珀罗标准具来分光;
4)利用迈克尔逊干涉+傅立叶变换的傅立叶分光:
5)利用光散射的分光。
分光光度计使用了两个部分来实现其检测的功能。第一部分是分光,将所使用的特定光源所发出的复合光分解为“单色光”,这些光通过样品,一部分光会被吸收或反射。第二部分是检测装置,对通过了样品的光进行分析,可以了解到某一波长段的光会出现大幅减少或其他的变化。这些变化的原因正是样品中含有某些特定的物质造成的。
分光光度计的具体使用方法:
(1)仪器预热。打开样品室盖(光门自动关闭)。开启电源,指示灯亮,仪器预热20 min。选择开关置于“T”旋钮,使数字显示为“00.0”。
(2)旋动波长手轮,把所需波长对准刻度线。
(3)将装有溶液的比色皿放置比色架中,令参比溶液置于光路。
(4)盖上样品室盖,调节透光率“100%T”旋钮,使数字显示为“100.0T”。(如显示不到100%T,则可加按一次。
(5)吸光度A的测量:仪器调T为0和100%后,将选择开关转换至A调零旋钮,数字显示应为“.000”。然后拉出拉杆,使被测溶液置入光路,数字显示值即为试样的吸光度A。
(6)测定完毕后,先打开样品室盖,再断电源。比色杯应清洗干净后,再贮放保存。