紫外可见分光光度计是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析仪器。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小,波长短的光线能量大。
在紫外可见分光光度计中,常见的光源有氙灯和镁灯等,而样品的光谱则可以通过单光束模式或双光束模式进行测量。具体来说,单光束模式指的是光线经过样品后直接进入光谱仪进行测量,而双光束模式则是将光线分成两束,一束经过样品,另一束则经过一个空白的参比通道,再将两种光线的吸光度进行比较。此外还可以选择不同的检测器,如光电离检测器和光电二极管检测器等,以便对不同波长范围的光进行测量和分析。
在使用紫外可见分光光度计时,需要注意以下一些操作技巧:
1、样品的制备:样品的制备要仔细、准确,避免出现误差。通常需要准确称量或配制样品,以保证测量的准确性和可重复性。
2、波长的选取:在选择测量波长时,应根据样品的性质和需要进行选择,避免测量范围过宽或过窄。
3、参比溶液的配制:在使用双光束模式时,需要准备空白参比溶液,以便和样品进行比较。参比溶液应根据样品性质选择适当的溶剂和波长。
4、光路的调整:在使用单光束模式时,需要调整光路,使光线准确进入光谱仪。此外,还需要调整光强、波长、积分时间等参数,以确保测量的准确性和可重复性。