752分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似，采用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质，引起物质中电子跃迁，从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化，记录光谱变化形成分析数据。
752分光光度计可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
752分光光度计的使用注意事项：
1)选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。
2)在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
3)吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。比色皿内溶液以皿高不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。
4)实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记。
5)测试品标注测试物质以及配置浓度。测试中，因采用测试品溶剂为空白对照：由仪器规定波长或者规定的吸收峰自动扫描测定，测吸收度以核对测试品吸收峰位置是否正确。
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