紫外分光光度计利用的是样品对紫外光的吸收能力不同的原理,以测量某一特定波长的紫外光波长能量发生吸收的程度。样品的吸收特性与其分子结构有关,因此,紫外光谱可以用于分析样品的化学结构以及其在制备和质控过程中的纯度和质量。
紫外分光光度计主要由光源、单色器、待测样品室、检测器和计算机等五部分组成。
1、光源:它的光源通常采用一束高压汞灯或者氘灯。
2、单色器:单色器的作用是选择所需的波长范围,以便用于测量。单色器通常由狭缝、光栅、反射镜等部件组成,用于将白光分解成不同波长的光,并按需选择出目标波长。
3、待测样品室:待测样品室是用于测量样品吸收率的部分。它是一个光学容器,内部涂有黑色材料,以减小反射和散射。样品通常放置在石英或者玻璃制成的管中,通过进入室内的光线照射,在检测器中收集出经样品所吸收的光线进行测量。
4、检测器:检测器通常采用光电倍增管(PMT)或者光敏二极管(PSD)等器件来测量样品的信号强度。
5、计算机:计算机用于输入、处理和输出数据。通常,计算机可以控制单色器、样品室等部分的功能,并将检测器中获得的数据转换成数字形式进行分析和处理。
紫外分光光度计广泛应用于化学、生物化学、药学、食品、环境保护等领域,通常用于以下应用:
1、物质定性和定量分析。
可以用于鉴定样品中不同化学元素和官能团。例如,当不同样品所吸收的波长和吸收率差异存在时,可以通过比对标准谱图来确定物质的种类。对于已知物质,可以通过测量吸收率来计算其浓度。
2、合成过程监控。
可以用于监测化合物的合成过程。通过不断检测反应的UV吸光度,可以了解化合物的浓度变化情况。
3、纯度检测。
可以用来检测样品的纯度。通过比对标准谱图,可以确定样品中其他杂质的含量,并确保所测量的样品不受到其他杂质的干扰。
4、生物分子分析。
可以用于检测蛋白质、核酸和多糖等生物分子。通常是通过测量吸收光谱中的A280来确定生物分子的浓度,从而用于研究其结构和功能。
紫外分光光度计*的分析原理和检测技术,可以为科研和工业应用提供出色的分析手段,为人类的健康与发展做出积极的贡献。