每种物质就有固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是紫外可见分光光度计原理定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
以下是紫外可见分光光度计的原理和基本操作步骤:
原理:
1.根据比尔定律,溶液中物质的吸光度与其浓度成正比,可用来定量分析。
2.光通过样品时,被样品吸收的光强度与入射光强度之比即为吸光度。
操作步骤:
1.打开电源,并预热一段时间以稳定仪器性能。
2.调节波长选择旋钮,选择所需的测试波长(紫外或可见光范围)。
3.使用空白试剂(溶剂)校准仪器,将空白试剂置于样品室中,调零吸光度。
4.取待测溶液样品,将其置于样品室中,关闭样品室,记录吸光度读数。
5.如果需要测定多个波长下的吸光度,依次调节波长选择旋钮进行测量。
6.根据实验需要,可以绘制吸光度与波长的曲线,进行定量或定性分析。
7.测量结束后,清洁样品室和光学元件,关闭仪器并保存数据。
注意:在操作紫外可见分光光度计时,应注意避免样品污染、保持仪器清洁,并按照仪器说明书和操作手册进行操作。